把條帶圈出來(lái)然后點(diǎn)測(cè)量 就是measure 出來(lái)的那個(gè)mean的數(shù)值就是灰度 應(yīng)該說(shuō)是白度值 條帶越深數(shù)值越小
IageJ這套軟件不但可以計(jì)算計(jì)算細(xì)胞數(shù),也可以定量分析DNA電泳或是Western blot條帶的灰度值。如何分析western-blot的條帶的灰度值?
材料/工具
Image J軟件
使用Image J軟件對(duì)Western blotting進(jìn)行結(jié)果分析時(shí),在“set measurement”選項(xiàng)里勾尋area”、“mean gray value”和“integrated density”,area代表實(shí)際操作過(guò)程中選取的面積大小,mean gray value代表單位面積含有的灰度值,integrated density是總
方法
打開(kāi)Image J軟件,進(jìn)入軟件主頁(yè);
做三遍western~相同條件~然后用imageJ等做光密度分析就可以做出誤差線~
打開(kāi)軟件后,開(kāi)啟圖檔;
把條帶圈出來(lái)然后點(diǎn)測(cè)量 就是measure 出來(lái)的那個(gè)mean的數(shù)值就是灰度 應(yīng)該說(shuō)是白度值 條帶越深數(shù)值越小
請(qǐng)先做校正,選擇Analyze底下的Calibrate選項(xiàng),再選擇校正的模式,使用Uncalibrate OD,再按ok,按下ok之后會(huì)出現(xiàn)校正的圖形;
就是看灰度比較表達(dá)量啊 灰度越高表達(dá)量越高 通過(guò)曝光的灰度值計(jì)算蛋白通常用image j(免費(fèi)),也可以通過(guò)一些商業(yè)軟件,bio-rad,band scan,可以
在要分析的第一條(first lane)加上一個(gè)長(zhǎng)型框(工具列第一個(gè)選項(xiàng)),再按下Analyze/Gels/select first Lane快速鍵(Ctr+1),此時(shí)框架中會(huì)出現(xiàn)一個(gè)號(hào)碼1,之后可以移動(dòng)框架到第二個(gè)lane再選擇Analyze/Gels/select second Lane快速鍵(Ctr+2),當(dāng)然可以一直加下去,最后按Analyze/Gels/plot Lanes快速鍵(Ctr +3)。
使用Image J軟件對(duì)Western blotting進(jìn)行結(jié)果分析時(shí),在“set measurement”選項(xiàng)里勾尋area”、“mean gray value”和“integrated density”,area代表實(shí)際操作過(guò)程中選取的面積大小,mean gray value代表單位面積含有的灰度值,integrated density是總
分析后會(huì)出現(xiàn)圖型表示你剛選擇的框內(nèi)的影像強(qiáng)度,此時(shí)可以看到有幾個(gè)比較高的區(qū)段,就是想定量的band,使用直線工具(工具列第五個(gè)選項(xiàng))先將圖形中高點(diǎn)為有band的區(qū)域和沒(méi)有band的區(qū)域分開(kāi)再,使用魔術(shù)棒工具(工具列第八個(gè)選項(xiàng))點(diǎn)選要分析的區(qū)域。
做三遍western~相同條件~然后用imageJ等做光密度分析就可以做出誤差線~
點(diǎn)選分析時(shí),在result的對(duì)話視窗會(huì)出現(xiàn)分析的數(shù)據(jù),依序點(diǎn)選就會(huì)出現(xiàn)每個(gè)band的值。
把條帶圈出來(lái)然后點(diǎn)測(cè)量 就是measure 出來(lái)的那個(gè)mean的數(shù)值就是灰度 應(yīng)該說(shuō)是白度值 條帶越深數(shù)值越小
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如何用image j分析western blot條帶
把條帶圈出來(lái)然后點(diǎn)測(cè)量 就是measure 出來(lái)的那個(gè)mean的數(shù)值就是灰度 應(yīng)該說(shuō)是白度值 條帶越深數(shù)值越小
用image j 軟件么 求教 intden 是指什么 分析western blot結(jié)果是用面積、平均灰度 、還是intden 比較好 ?
就是看灰度比較表達(dá)量啊 灰度越高表達(dá)量越高 ...通過(guò)曝光的灰度值計(jì)算蛋白...通常用image j(免費(fèi)),也可以通過(guò)一些商業(yè)軟件,bio-rad,band scan,可以...追問(wèn)平均光密度值 和灰度值哪個(gè)更可靠 有何區(qū)別啊
使用iamge j分析western blot的結(jié)果,測(cè)量出來(lái)之后,分析時(shí)應(yīng)該采用的是mean 還是intden??? 急求
使用Image J軟件對(duì)Western blotting進(jìn)行結(jié)果分析時(shí),在“set measurement”選項(xiàng)里勾選“area”、“mean gray value”和“integrated density”,area代表實(shí)際操作過(guò)程中選取的面積大小,mean gray value代表單位面積含有的灰度值,integrated density是總灰度值,即area的值與mean gray value的值直接相乘的數(shù)值。
也就是說(shuō),如果需要比較蛋白條帶的含量,用于比較的應(yīng)該是integrated density的值。來(lái)自:求助得到的回答
western blot對(duì)照組怎么才能有誤差線
做三遍western~相同條件~然后用imageJ等做光密度分析就可以做出誤差線~
如何用image j分析western blot條帶
把條帶圈出來(lái)然后點(diǎn)測(cè)量 就是measure 出來(lái)的那個(gè)mean的數(shù)值就是灰度 應(yīng)該說(shuō)是白度值 條帶越深數(shù)值越小