顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器，已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡，人們看到了過去看不到的許多微小生物和構(gòu)成生物的基本單元——細(xì)胞。目前，不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡，而且有放大幾十萬(wàn)倍的電子顯微鏡，使我們對(duì)生物體的生命活動(dòng)規(guī)律有

光學(xué)顯微鏡（英文Optical Microscope，簡(jiǎn)寫OM）是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。

低倍鏡的使用方法

認(rèn)識(shí)顯微鏡使用顯微鏡顯微鏡的結(jié)構(gòu)[方法步驟]：一、認(rèn)識(shí)顯微鏡的構(gòu)造機(jī)械部分鏡座鏡柱鏡臂載物臺(tái)（通光孔、壓片夾）鏡筒轉(zhuǎn)換器粗準(zhǔn)焦螺旋細(xì)準(zhǔn)焦螺旋遮光器（光圈）反光鏡（平面鏡、凹面鏡）顯微鏡的構(gòu)造光學(xué)部分目鏡:5×、10×、16×物鏡：10×、40×

取鏡和放置：顯微鏡一般存放在專門的柜或箱中，用時(shí)從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座后端距桌邊1－2寸為宜，便于坐著操作。

使用方法： 1、將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。 2、撥動(dòng)反光鏡，調(diào)節(jié)至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面，光源強(qiáng)時(shí)用平面，較暗時(shí)用凹面，需要強(qiáng)光時(shí)，將聚光器提高，光圈放大；需要弱光時(shí)，將聚光器降低，或光圈適當(dāng)縮校 3、將待觀察

對(duì)光：用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動(dòng))，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)聽到碰叩聲時(shí)，說明物鏡光軸已對(duì)準(zhǔn)鏡筒中心)。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。

顯 微 鏡 的 使 用 步 驟 ： 1. 選取最低倍數(shù)的接目鏡和接物鏡； 顯微鏡的放大率 = 接目鏡的倍數(shù) x 接物鏡的倍數(shù)； 2. 從接目鏡望下去，調(diào)較反光鏡的角度 , 以獲得最光的視野； 3. 把玻片放在載物臺(tái)上 , 移動(dòng)玻片使要觀察的物件恰好在接物鏡下；

放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切記不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。

普通光學(xué)顯微鏡的使用方法 使用方法：（一）顯微鏡的主要構(gòu)造 普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分：機(jī)械部分、照明部分和光學(xué)部分。 1.機(jī)械部分 （1）鏡座：是顯微鏡的底座，用以支持整個(gè)鏡體。 （2）鏡柱：是鏡座上面直立的部分，用以連接鏡座

調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處，應(yīng)注意在上升鏡臺(tái)時(shí)，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上升，以免上升過多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時(shí)睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時(shí)針方向緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。

顯微鏡的使用步驟為：取鏡、安放、觀察。 擴(kuò)展資料顯微鏡的操作方法： 1． 調(diào)節(jié)亮度：由暗調(diào)亮，可以用大光圈，凹面鏡，調(diào)節(jié)反光鏡的角度。 2． 將臨時(shí)裝片在載物臺(tái)上適當(dāng)位置固定好。 3．低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，使用粗準(zhǔn)焦螺旋將鏡筒自上而下的調(diào)

如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心(注意移動(dòng)玻片的方向與視野物象移動(dòng)的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí)，鏡臺(tái)下降已超過工作距離(>5.40mm)而未見到物象，說明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺(tái)。

認(rèn)識(shí)顯微鏡使用顯微鏡顯微鏡的結(jié)構(gòu)[方法步驟]：一、認(rèn)識(shí)顯微鏡的構(gòu)造機(jī)械部分鏡座鏡柱鏡臂載物臺(tái)（通光孔、壓片夾）鏡筒轉(zhuǎn)換器粗準(zhǔn)焦螺旋細(xì)準(zhǔn)焦螺旋遮光器（光圈）反光鏡（平面鏡、凹面鏡）顯微鏡的構(gòu)造光學(xué)部分目鏡:5×、10×、16×物鏡：10×、40×

高倍鏡的使用方法

(一)實(shí)驗(yàn)時(shí)要把顯微鏡放在座前桌面上稍偏左的位置，鏡座應(yīng)距桌沿6～7 cm左右。 (二) 打開光源開關(guān)，調(diào)節(jié)光強(qiáng)到合適大校 (三)轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡頭正對(duì)載物臺(tái)上的通光孔。先把鏡頭調(diào)節(jié)至距載物臺(tái)1～2cm左右處，然后用左眼注視目鏡內(nèi)，接著

選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別： 1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 2.光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡； 3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人

轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新操作。

在光學(xué)顯微鏡的樣品制備過程中，樣品的切片厚度在2～25um之間；電鏡的切片厚度在50-100nm以內(nèi)（高壓電鏡除外，其樣品厚度可達(dá)到1um），所以采用的切片方法，也不盡相同。 在載體方面，光學(xué)顯微鏡的的切片的載體是玻片，而電鏡切片的載體是載網(wǎng)。

調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時(shí)一般能見到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動(dòng)約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別： 1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 2.光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡； 3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人

如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí)，必須順時(shí)針(切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡臺(tái)下降，方可取下玻片標(biāo)本。

一）正置顯微鏡 1、安放 右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩(wěn)，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側(cè)，距離桌邊3～4厘米處。 2、清潔 檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機(jī)械部分可用干凈軟布擦拭。透

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光學(xué)顯微鏡的樣品要求是什么？

在光學(xué)顯微鏡的樣品制備過程中，樣品的切片厚度在2～25um之間；電鏡的切片厚度在50-100nm以內(nèi)（高壓電鏡除外，其樣品厚度可達(dá)到1um），所以采用的切片方法，也不盡相同。

在載體方面，光學(xué)顯微鏡的的切片的載體是玻片，而電鏡切片的載體是載網(wǎng)。

在固定方面，光學(xué)顯微鏡的切片使用復(fù)合固定液固定，而電鏡切片，只用單一固定液進(jìn)行重復(fù)固定

在染色方面，光學(xué)樣品的染色較為簡(jiǎn)單，根據(jù)不同的觀測(cè)樣品及光學(xué)顯微鏡的類型，通常以固定的一些染色劑染色就行了。而電鏡樣品再染色方面的方法很多，而且也很復(fù)雜，比如負(fù)染色、銀染色等等。

在包埋方面，光學(xué)顯微鏡切片使用石蠟、火棉膠、明膠等做包埋劑；電鏡切片則用環(huán)氧樹脂、聚苯乙烯樹脂、異丁烯樹脂及水溶性樹脂等做包埋劑。

為了使顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明，在顯微鏡初次安裝和調(diào)試時(shí)，就必須把照明光路系統(tǒng)調(diào)整好，這是正確使用顯微鏡，并獲得正確、可*結(jié)果的重要手段和最基本的要求。此外，正確掌握照明光路系統(tǒng)的調(diào)整，是使用顯微鏡過程中更換光源燈泡后所必經(jīng)的步驟，也是在日常使用過程中不時(shí)地檢驗(yàn)顯微鏡性能的必要手段。顯微鏡照明光路系統(tǒng)的調(diào)整主要有以下4項(xiàng)內(nèi)容：1．照明光源燈室在顯微外的初步調(diào)整① 首先將燈室的外殼打開，壓彈簧夾子將鹵素?zé)襞菅b入插座中，安裝時(shí)避免手指直接接觸燈泡（可用柔軟的布或紙隔住），以免燈泡上留有指紋等臟物，影響燈泡的使用壽命。②把燈室擺在桌面上，接通電源后，用專用的螺絲刀調(diào)節(jié)燈的調(diào)焦旋鈕孔（標(biāo)有“←→”），使燈絲投影在1-2m外的墻上，將燈絲成像調(diào)至清晰；然后調(diào)節(jié)燈的高低位置調(diào)節(jié)絲孔（標(biāo)有“──”），使燈絲位置高低適當(dāng)；再調(diào)節(jié)燈的左右位置調(diào)節(jié)螺絲孔（標(biāo)有“──”），使燈絲左右位置合適。2．光源發(fā)光體（燈絲）在顯微鏡內(nèi)位置的檢驗(yàn)和校正　目的是為了把發(fā)光體的像端端正正地調(diào)入物鏡的視域范圍內(nèi)，從光源的角度去確保顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明，這是調(diào)整庫(kù)勒照明系統(tǒng)的前提條件。需要的基本工具：對(duì)中望遠(yuǎn)鏡購(gòu)置顯微鏡時(shí)已配備。① 拔掉燈庫(kù)內(nèi)的毛玻璃套筒，把燈室裝回顯微鏡上②選用10×物鏡，開亮光源程序找樣品并調(diào)焦清晰，再換用40×物鏡把樣品調(diào)焦清晰（40×物鏡可以看清燈絲的全貌）；③把聚光鏡的孔徑光闌和視場(chǎng)光闌均開到最大；④拔掉其中一個(gè)目鏡，換上對(duì)中望遠(yuǎn)鏡，抓住白色部分，另一手伸縮黑色接目鏡，就可在視野中看到燈絲像；⑤如燈絲位置不合適，調(diào)“──”孔，把燈絲像沿水平方向調(diào)好，調(diào)“──”孔，把絲像沿垂直方向調(diào)好，直至將燈絲像調(diào)至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像；⑥調(diào)整完畢后，將毛玻璃套筒插回原位，拔掉對(duì)中望遠(yuǎn)鏡，換回目鏡作下一步調(diào)整。以上所述照明光源燈室在顯微鏡外的調(diào)整和光源發(fā)光體在顯微鏡內(nèi)位置的校驗(yàn)，只需在顯微鏡初次安裝調(diào)試及更換燈泡時(shí)進(jìn)行，平時(shí)使用顯微鏡時(shí)不能隨意亂調(diào)亂動(dòng)。萬(wàn)一調(diào)亂時(shí)，可按上述步驟調(diào)回原狀。3．庫(kù)勒照明（Kohler）系統(tǒng)的正確調(diào)整　顯微鏡的正確調(diào)試，主要工作之一是照明光路系統(tǒng)的調(diào)整，而其中的關(guān)鍵是庫(kù)勒照明系統(tǒng)的調(diào)整。對(duì)于每一位使用顯微鏡的人員，特別是作顯微照像的人員來說，應(yīng)該對(duì)庫(kù)勒照明系統(tǒng)的原理及其調(diào)整步驟有一定的了解和掌握，才能充分發(fā)揮顯微鏡應(yīng)有的功能，拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。庫(kù)勒照明系統(tǒng)的原理簡(jiǎn)單來說就是：光源發(fā)光體上任意一點(diǎn)發(fā)出的光，可以照明顯微鏡的視域范圍，而光源發(fā)光體上每一點(diǎn)所發(fā)出的光匯集起來，在顯微鏡的視域中就實(shí)現(xiàn)了非常充分而又均勻的照明。調(diào)整庫(kù)勒照明系統(tǒng)的目的，是為了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明，防止雜散光對(duì)照像系統(tǒng)造成影響或干擾，以免照像時(shí)在底片形成灰霧。高調(diào)整庫(kù)勒照明系統(tǒng)的必要部件：視場(chǎng)光闌、可進(jìn)行合軸調(diào)整的聚光鏡系統(tǒng)。① 選用10×物鏡和10×目鏡② 把聚光鏡前端透鏡擺進(jìn)光路中，孔徑光闌調(diào)至適中的位置上（不大不?。?，再把聚光鏡升到最頂?shù)奈恢蒙?，聚光鏡轉(zhuǎn)盤調(diào)至明視野“J”位置③ 把視場(chǎng)光闌調(diào)至最?。?.1）④ 載物臺(tái)上放上已封片的生物樣品，開亮光源，調(diào)焦清晰⑤ 視域中會(huì)出現(xiàn)一個(gè)局部照明的區(qū)域或亮斑，這是視場(chǎng)光闌的模糊像，在其中可以清晰地看到樣品的細(xì)節(jié)；在它之外是較暗的視域，不一定能把樣品的細(xì)節(jié)看得清楚⑥把聚光鏡微微地向下調(diào)，使視野中的亮斑逐漸收小，慢慢變成一個(gè)清晰的多邊形象，這便是視場(chǎng)光闌的清晰像；⑦一般情況下，多邊形象并不在視域中央，需要調(diào)整聚光鏡的一對(duì)調(diào)中螺絲，把視場(chǎng)光闌多邊形的像調(diào)至中央位置；⑧逐漸開大視場(chǎng)光闌，使多邊形象成為視域的內(nèi)接多邊形，進(jìn)一步核對(duì)調(diào)中的狀況，如對(duì)中不夠理想，7a64e4b893e5b19e31333431373839繼續(xù)微微調(diào)對(duì)中螺絲；⑨將視場(chǎng)光闌稍為再微微開大一些，使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上，至此，庫(kù)勒照明系統(tǒng)調(diào)整完畢。庫(kù)勒照明系統(tǒng)調(diào)整好以后，整個(gè)視域照明均勻，拍攝的顯微照片明亮清晰，反差正常。在日后使用過程中應(yīng)特別注意： a. 視場(chǎng)光闌不可任意開大，但可隨物鏡倍數(shù)的增大而將視場(chǎng)光闌收小，隨物鏡倍數(shù)的減小而開大； b. 聚光鏡的高低位置不準(zhǔn)亂調(diào)，否則會(huì)破壞已調(diào)整好的庫(kù)勒照明系統(tǒng)； c. 使用10×以下物鏡時(shí)要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外，使用10×或10×以上物鏡時(shí)要將前端透鏡擺入光路中； d. 關(guān)于物鏡倍數(shù)與視場(chǎng)光闌大小配合問題，在實(shí)際使用過程中，作為一般觀察不一定要收小或開大視場(chǎng)光闌，但作顯微照相時(shí)，為了避免雜散光線對(duì)照相系統(tǒng)的干擾，以便能拍攝到較完善的照片，則應(yīng)在使用每一個(gè)倍數(shù)的物鏡時(shí)，把視場(chǎng)光闌調(diào)節(jié)到正好消失于所觀察的視域邊上，這是比較繁復(fù)的工作，但又非做不可。較為簡(jiǎn)便的方法是把與各個(gè)倍數(shù)物鏡相對(duì)應(yīng)的視場(chǎng)光闌事先調(diào)整好，并作好記號(hào)，以后使用時(shí)根據(jù)記號(hào)直接調(diào)至相應(yīng)的位置。4．孔徑光闌的正確使用　由于聚光鏡的孔徑光闌可以影響顯微鏡的分辨率，使用時(shí)應(yīng)掌握正確的使用方法。過去由于對(duì)孔徑光闌的認(rèn)識(shí)不足，往往把它當(dāng)作是調(diào)節(jié)視野亮度的工具。雖然調(diào)節(jié)孔徑光闌在一定程度上可以改變視野的亮度，但會(huì)直接影響成像的反差、對(duì)比度及分辨率，在使用過程中應(yīng)盡可能避免。為了發(fā)揮聚光鏡孔徑光闌的作用，以便在觀察時(shí)，尤其在作顯微照相時(shí)獲得最佳分辨率，在每換用一個(gè)倍數(shù)的物鏡時(shí)，在樣品調(diào)焦清晰后，需要調(diào)節(jié)孔徑光闌，使它的大小正好等于所用物鏡數(shù)值孔徑（物鏡孔徑像）的2/3 。調(diào)整方法是用對(duì)中望遠(yuǎn)鏡對(duì)焦于視野中黑色相差環(huán)上，調(diào)節(jié)孔徑光闌，可以看到一個(gè)多邊形的孔徑光闌像，然后調(diào)到等于物鏡孔徑像的2/3，即介于黑色相差環(huán)外與圓形視域內(nèi)之間。為方便起見，可把與各倍數(shù)物鏡相對(duì)應(yīng)的孔徑光闌預(yù)先調(diào)整好，并作好標(biāo)記，以免每次使用都要重新調(diào)整。

普通光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡的區(qū)別有什么？

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別：

1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上；?

2.光源為紫外光zhidao，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡；?

3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線版，用以保護(hù)人目。

熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡權(quán)與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。 　　

熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

光學(xué)顯微鏡的操作步驟及保養(yǎng)方法？

一）正置顯微鏡

1、安放

右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩(wěn)，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側(cè)，距離桌邊3～4厘米處。

2、清潔

檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機(jī)械部分可用干凈軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭，如有膠或粘污，可用少量二甲苯清潔之。

3、對(duì)光

鏡筒升至距載物臺(tái)1～2厘米處，低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。調(diào)節(jié)光圈和反光鏡，光線強(qiáng)時(shí)用平面鏡，光線弱時(shí)用凹面鏡，反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動(dòng)。

若使用的為帶有光源的顯微鏡，可省去次步驟，但需要調(diào)節(jié)光亮度的旋鈕。

4、安裝標(biāo)本

將玻片放在載物臺(tái)上，注意有蓋玻片的一面一定朝上。用彈簧夾將玻片固定，轉(zhuǎn)動(dòng)平臺(tái)移動(dòng)器的旋鈕，使要觀察的材料對(duì)準(zhǔn)通光孔中央。

5、調(diào)焦

調(diào)焦時(shí)，先旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕慢慢降低鏡筒，并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到物鏡貼近玻片標(biāo)本，然后左眼自目鏡觀察，左手旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本物像時(shí)停止，再用細(xì)調(diào)焦旋鈕回調(diào)清晰。

操作注意：不應(yīng)在高倍鏡下直接調(diào)焦；鏡筒下降時(shí)，應(yīng)從側(cè)面觀察鏡筒和標(biāo)本間的間距；要了解物距的臨界值。

若使用雙筒顯微鏡，如觀察者雙眼視度有差異，可靠視度調(diào)節(jié)圈調(diào)節(jié)。另外雙筒可相對(duì)平移以適應(yīng)操作者兩眼間距。

6、觀察

若使用單筒顯微鏡，兩眼自然張開，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。

鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。

光強(qiáng)的調(diào)節(jié)：一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無色或未染色標(biāo)本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。除調(diào)節(jié)反光鏡或光源燈以外，虹彩光圈的調(diào)節(jié)也十分重要。

（1）低倍鏡觀察

觀察任何標(biāo)本時(shí)，都必須先使用低倍鏡，因?yàn)槠湟曇按?，易發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定要觀察的部位。

（2）高倍鏡觀察

從低倍鏡轉(zhuǎn)至高倍時(shí)，只需略微調(diào)動(dòng)細(xì)調(diào)焦旋鈕，即可使物像清晰。

使用高倍鏡時(shí)切勿使用粗調(diào)焦旋鈕，否則易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭。

轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器時(shí)，不可用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，這樣容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜，轉(zhuǎn)換器螺紋受力不均勻而破壞，最后導(dǎo)致轉(zhuǎn)換器就會(huì)報(bào)廢。

（3）油鏡的觀察

先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央后，再換油鏡觀察。油鏡觀察前，應(yīng)將顯微鏡亮度調(diào)整至最亮，光圈完全打開。

使用油鏡時(shí)，先在蓋玻片上滴加一滴香柏油（鏡油），然后降低鏡筒并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到油鏡浸入香柏油并貼近玻片標(biāo)本，然后用目鏡觀察，并用細(xì)調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本的焦段時(shí)停止并調(diào)節(jié)清晰。

香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢后一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦鏡紙擦去多余二甲苯。

7、結(jié)束操作

觀察完畢，移去樣品，扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使鏡頭V字型偏于兩旁，反光鏡要豎立，降下鏡筒，擦抹干凈，并套上鏡套。

若使用的是帶有光源的顯微鏡，需要調(diào)節(jié)亮度旋鈕將光亮度調(diào)至最暗，再關(guān)閉電源按鈕，以防止下次開機(jī)時(shí)瞬間過強(qiáng)電流燒壞光源燈。

（二）倒置顯微鏡

倒置顯微鏡與正置顯微鏡的主要區(qū)別在于物鏡位于載物臺(tái)下方，這樣有利于觀察時(shí)在上方對(duì)樣品進(jìn)行一些實(shí)時(shí)操作。

倒置顯微鏡操作過程基本與雙筒的正置顯微鏡相似，需注意以下幾點(diǎn)：

觀察時(shí)可調(diào)節(jié)鉸鏈?zhǔn)诫p目目鏡至舒適的位置。

組織培養(yǎng)液或水濺到載物臺(tái)上、物鏡上或顯微鏡鏡架上可能會(huì)損傷設(shè)備。如果濺上后，應(yīng)該立即從墻上插座拔下電源線，擦去濺出液或水。

一定要輕柔轉(zhuǎn)動(dòng)光強(qiáng)調(diào)e799bee5baa6e78988e69d8331333264636164節(jié)鈕，不要試圖將旋鈕轉(zhuǎn)過終點(diǎn)位置。使用后一定要先將燈的強(qiáng)度調(diào)至最小再關(guān)電源。

使用后要旋轉(zhuǎn)三孔轉(zhuǎn)換器，使物鏡鏡片置于載物臺(tái)下側(cè)，防止灰塵的沉降。

（三）實(shí)體顯微鏡

又稱體視顯微鏡或解剖顯微鏡。操作步驟基本和雙筒正置顯微鏡類似：

取用解剖鏡時(shí)，移動(dòng)需用雙手，保持穩(wěn)重。若需連鏡箱搬動(dòng)，應(yīng)將鏡箱鎖好，同時(shí)鏡箱的鑰匙必須拔除。

鏡管上若有防塵罩，應(yīng)取下并換上目鏡及眼罩。

將樣品置于玻片上或蠟盤中再放到載物盤上待觀察。擰開鎖緊螺絲，把鏡體先上升到一定高度，然后鎖緊鏡體。

觀察前可先轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡管以適合眼間距。雙眼視度差異可用視覺圈調(diào)節(jié)。

對(duì)焦時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)升降螺絲不能太快或強(qiáng)行扭轉(zhuǎn)，謹(jǐn)防損壞齒輪。

如需放大觀察，再轉(zhuǎn)動(dòng)倍率盤直到所需放大倍率。物像越大，光線越暗，必須調(diào)好光源選擇好背景物。

用畢后，先將載物盤上的東西拿走，松開鎖緊螺絲將鏡體放下并鎖緊。取出目鏡并換上防塵罩。將元件全部放回，注意不要與其它鏡互換。用布把鏡身擦干凈，放入鏡箱內(nèi)，鎖緊鏡箱。

使用普通光學(xué)顯微鏡的具體步驟是什么？

一、取鏡

1．右手握住鏡臂，左手托住鏡座。

2．把顯微鏡e5a48de588b67a6431333363396433放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。?

二、對(duì)光

3．轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺(tái)要保持2厘

米的距離)。

4．把一個(gè)較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開，便于以后同時(shí)畫圖)。轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡，可以看到白亮的視野。?

三、觀察

5．把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。

6．轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標(biāo)本）。

7．左眼向目鏡內(nèi)看，同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

8、光學(xué)顯微鏡

顯微鏡是一種顯微鏡結(jié)構(gòu)精密的光學(xué)儀器，已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡，人們看到了過去看不到的許多微小生物和構(gòu)成生物的基本單元--細(xì)胞。不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡，而且有放大幾十萬(wàn)倍的電子顯微鏡，使我們對(duì)生物體的生命活動(dòng)規(guī)律有了更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。在普通中學(xué)生物教學(xué)大綱中規(guī)定的實(shí)驗(yàn)中，大部分要通過顯微鏡來完成，因此，顯微鏡性能的好壞是做好觀察實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。

普通光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡的區(qū)別

熒光抄顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別：

1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上；?

2.光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡；?

3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物百鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人目。

熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種度，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。 　　

熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)問和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡答系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。